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PCR之原理與應用
作者:
吳游源
分類:
科學•自然
/
生物學
出版社:
五南文化
出版日期:2020/2/1
ISBN:9789577638212
書籍編號:kk0507268
頁數:268
定價:
480
元
一般會員價:
9
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432
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特別會員價:
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元
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PCR之原理與應用 內容簡介 聚合酶鏈鎖反應(polymerase chain reaction; PCR)是一個被高度依賴、且被普遍應用的分子生物學技術,它可以將一特定DNA片段(或基因)由構造複雜的染色體或其他DNA來源(或樣品)中大量增幅出來。這就好像是一個超炫的戲法,可以由一堆如山的黃沙中,將其內所埋藏的幾顆金沙子篩選出來,並且複製成幾百萬顆金沙。如此,不但可以證明沙堆中確有金沙子的存在,並可以因此獲得大量的金沙。換句話說,PCR是一個分析型(analytical)也是一個製備型(preparative)的研究工具,它不但可以藉由強效的增幅機制,來偵測一個DNA樣品中是否含有某一特定DNA片段(或基因),而且藉由增幅可以大量製取(有時也可加以修飾)此DNA片段,以作為多種生技應用研究之材料,例如DNA 定序、基因選殖、重組蛋白表現等。此項技術可說是現今分子生物學研究中最重要的分析工具之一,同時也是多數從事生物醫學、分子遺傳分析、及基因診斷等相關領域研究所不可或缺的技術。
作者簡介 吳游源 學歷 美國普渡大學化學系生物化學組博士 現職 嘉義大學生化科技學系助理教授 專長 生物化學、分子生物學、分子毒物
目錄 【PART I 聚合酶鏈鎖反應(Polymerase Chain Reaction; PCR)之緣起與原理】 第1章 PCR發展之背景與歷史 1-1 PCR:一個二十世紀分子生物學研究的突破性技術 1-2 PCR技術的發展簡史 第2章 典型PCR的反應成分與條件設定 2-1 典型的PCR反應成分 2-2 典型的PCR反應條件 2-3 循環增幅的細節(Details of Cycling Amplification) 2-4 PCR偵測實驗的對照組 第3章 PCR的產率與專一性(Sensitivity and Specificity of PCR) 3-1 PCR反應可能遭遇的問題與改進方法 3-2 PCR反應抑制劑 3-3 增進PCR產率與專一性的試劑 3-4 調整PCR的方法來增進產率或專一性 3-5 長片段與富含GC(GC-rich)的DNA片段之PCR增幅 第4章 PCR的忠誠性(或出錯率)(Fidelity of PCR Amplification) 4-1 PCR的錯誤率(或忠誠性)對我們的研究有何影響? 4-2 聚合酶加入錯誤核苷酸的機制 4-3 影響PCR忠誠性的因素 【PART II PCR之基礎應用(Basic Applications of PCR)】 第5章 逆向PCR(Inverse PCR; IPCR):引子背對背的PCR連接反應媒介PCR(Ligation Mediated PCR; LMPCR) 5-1 IPCR對未知序列之增幅 5-2 IPCR應用於刪除突變與定點突變之基因建構 5-3 以連接反應媒介PCR(LMPCR)進行未知序列之增幅 5-4 LMPCR指紋分析(LMPCR Fingerprinting Analysis) 5-5 以LMPCR進行DNA胞內腳紋(in vivo Footprinting)分析 第6章 多重引子PCR(Multiplex PCR; mPCR)與巢狀PCR(Nested PCR) 6-1 多重引子PCR(Multiplex PCR; mPCR) 6-2 巢狀PCR(Nested PCR) 第7章 反轉錄PCR(Reverse Transcription PCR; RT-PCR) 7-1 RT-PCR的用途 7-2 RT-PCR的基本步驟 7-3 反轉錄酶的特性與選擇 7-4 單一步驟或兩步驟RT-PCR 7-5 RT-PCR 經常被用於分析特定基因之差異性表現 第8章 定量PCR與即時PCR(Quantitative PCR and Real-time PCR) 8-1 早期定量PCR是一種終端PCR(End-point PCR)的分析方式 8-2 新一代的定量PCR:即時PCR(Real-time PCR) 第9章 應用PCR做全基因體差異性分析(Whole Genome Variation Analysis by PCR) 9-1 RAPD:隨機增幅多型性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA) 9-2 AFLP:增幅片段長度多型性(Amplified Fragment Length Polymorphism) 9-3 IRS-PCR:散布性重複序列PCR(Interspersed Repeat Sequence PCR) 9-4 STR-PCR:短而連續重複序列PCR(Short Tandem Repeat PCR) 9-5 CODIS:組合式DNA指標系統(Combined DNA Index System) 第10章 PCR於基因選殖之應用(PCR Mediated DNA Cloning) 10-1 T/A(或稱A/T)選殖(T/A Cloning) 10-2 利用PCR 將目標DNA 兩側加入選殖所需特定限制性內切酶之辨識序列 10-3 不需使用連接酶或限制性酵素的特殊PCR基因選殖 10-4 使用degenerate引子的PCR與基因建構 10-5 利用PCR 來製備單股目標基因(或DNA) 第11章 利用PCR偵測基因突變(Mutation Detection by PCR) 11-1 已知突變點與突變方式之PCR偵測 11-2 特定基因中之未特定突變點(或型態)之PCR相關偵測 第12章 利用PCR來創造突變(PCR Mediated Mutagenesis) 12-1 利用PCR定點突變(PCR Mediated Site-Directed Mutagenesis) 12-2 以兩步驟PCR方法來製備一長片段插入性突變(Two-PCR Method for Making a Long Insertion Mutant) 12-3 連接子掃描突變(Linker Scanning Mutagenesis; LSM) 12-4 利用PCR進行隨機突變(PCR Mediated Random Mutagenesis) 第13章 結語 英中文索引
多巴胺聖經:為什麼生
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第一本黴菌全書:微觀
Q1:若我已報名付了1000元訂金,接下來我要做什麼? A:感謝您報名,後續相關事情及服務我們會以e-mail和電話跟您聯絡. 您也可以主動來信(andy@book4u.com.tw)詢問。謝謝! Q2:我本身並沒有產品和服務,也沒什麼實務上的經驗,那又能如何賺錢呢?這個課程真的有實際成效嗎? A:我們這個課程共有11項贈品,其中第2項贈品便是資訊產品創造藍圖,它將教您如何用最簡潔而快速的方法創出屬於您自己的資訊產品。一般的課程大多是教您如何捕魚,但多數的成功致富者,其成功的關鍵卻不是仰賴捕魚技術,而是仰賴借力之術,因為唯有借力才能無中生有!才能快速成長!也才能快速致富!本課程3天共有三套樣版,其中一套樣版便是教您打造在沒有任何商品與服務,也沒有任何資源的情況下,就能快速借力致富的樣版!本課程二位講師都是白手起家,對於沒有實務經驗的新手會格外用心,請放心。 Q3:請問贈品中魚池矩陣直效聯盟VVIP是什麼? A:這是一個強大的系統,而我們送的是體驗版,會提供你Email追客系統。國外有一種函授課程,亦即每幾天發一個課程給學員, 就是用EMAIL追客系統來實踐。EMAIL追客系統簡單的說就是今天有一個客戶在你的網站上購買產品或註冊,系統會自動回覆一封確認信,之後你可以自行設計發送內容和發信時間一次一對多發給客戶,而且每封信還會帶入客戶本身的姓名。讓客戶以為是我們專門為客戶所量身訂作的信件。所以Email追客系統可以讓你培養跟客戶的信任感,進而成交。 Q4:請問贈品中資訊產品創造藍圖是什麼? A:這是一位叫林星?老師的課程,課程售價是9800元,現在免費送給你。此課程包含: ● 何謂資訊型產品? ● 資訊型產品的種類大解析!以及如何組織你的資訊型產品賺錢? ● 如何找到你的利基市場? ● 為什麼錯的利基市場,再好的產品與行銷也很難有效! ● 29個國外已經證實能讓你賺到錢的利基市場! ● 如何確保你做出來的產品客戶會很想購買?以及實際可執行的步驟! ● 創造資訊型產品計劃書 ● 15個步驟建立你的資訊型產品事業 ● E-mail精準行銷的10個法則 ● 10個別人沒有告訴你的有效文案撰寫法則 Q5:請問贈品中自動財富系統 6片DVD是什麼? A:此6片DVD定價3200元。內容為《借力淘金!最吸利的鈔級魚池賺錢術》作者之一王紫杰所錄製的DVD,內容為有關網路行銷的知識和技巧,非常豐富且實用,免費送給您。
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